Fluorescence-activated single cell sorting (FACS)란,
Flow cytometry로 분석된 세포들 중에서 특정 세포만을 분류해내는 Sorting 기법으로
Flow cytometry 기계에 추가적으로 설치된 장치가 원하는 세포가 포함된 물방울에 전하(Electronic charge)를 부여하고,
전하에 따라 해당 세포를 분류해내는 기술이다.
유액상태의 세포를 sheath 용액과 함께 흘려 보내면서 특정 파장의 laser beam을 조사하여 수 많은 세포 중 하나의 세포가 갖는 다양한 특성(크기, complexity, 특정 파장에 대한 형광발광도 등)을 정성/정량 분석하고, 특정 형광에 반응하는 세포들만을 선택하여 분리(sorting)할 수 있는 장비이다.
이때 세포를 감지하기 위해서는 일정 파장을 띄는 형광이 표지된 항체 같은 형광 염색소의 표지가 필수적이며, laser에 의한 형광의 발광현상을 기반으로 감지한다. 측정 후에도 세포는 생존하고 있기에, 필요한 세포 한개 또는 일정 수량을 채취하여 연속적인 연구 및 타 기기 측정이 가능한 장점을 지니고 있다.
[ Sorting 서비스 ]
1. Sample의 세포수는 최소 1*106/ml 이 되게 해주세요
density 가 낮은 경우 cetrifuge 등으로 농도를 높게 준비해주세요
필요에 따라 buffer에 희석해 분석합니다. 희석할 solution도 같이 준비해주세요
2. Sorting buffer
PBS(Ca/Mg++ free) or HBSS(Ca/Mg++ free) or MEDIA
+ 2~5% FCS or FBS or 0.5~2% BSA
+ final 25mM HEPES (pH7.5) (optional cell size가 작으면 권장)
+ final 2mM EDTA (optional aggregation이 잘 일어나는 cell이면 권장)
→ 1.2uM filter sterilize . store at 4℃
3. Sorting cell density
lymphocytes : ~ 4 x 107/ml
cancer cell line : ~ 4 x 106/ml (Max 1 x 107 /ml) in sorting buffer
cell strainer로 cell 걸러서 준비해주세요
4. Cell collection tube
5ml tube : 1ml buffer 담아 오세요
15ml tube : 3ml buffer 담아 오세요
PBS(Ca/Mg++ free) or HBSS(Ca/Mg++ free) or MEDIA
+10% FBS or FCS or 0.5~ 2% BSA
- 레이져 초고속 유세포 자동 분리기는 다양한 레이저를 에너지원으로 이용하여, 유액 상태의 단일 입자나 세포가 일정 감지 지역을 통과함과 동시에 레이저를 만나서 발생하는 발광신호를 물리적인 수치로 변환시켜 얻어진 데이터를 기반으로 여러 특징들을 측정 분석 후, 세포분리기(cell sortor)기능을 이용하여 원하는 세포 분리를 하고자 한다.
- 기본적으로 분자 생물학에서 기본인 세포주를 형성하고 세포의 분리, 면역학에서 다양한 혈구 세포의 분리가 가능하며, 식물의 세포 생물학, 세포계수, 세포공학, 화학적 특성, 세포학, 해양생물 및 세포의 소포 나노입자 등을 연구하며 줄기세포 연구, 유전체학, 바이오프로세싱, 암세포 연구 등 다양한 범위의 연구 응용 분야에서 활용되고 있다.
모델명 : FACSAria Fusion
1.Nozzle : 70, 85, 100, 130㎛ (기본 85㎛ 장착)
2.Sort collection devices : Two-way sorting (15㎖ tubes),
Four-way sorting (12x75㎜, Micro tubes), well Plate sorting
3.Laser : 3L 11C
